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在微生物發(fā)酵中，因其分布廣和體積小等特性，導(dǎo)致染菌的因素也多樣。所以我們無(wú)法在實(shí)驗(yàn)中及時(shí)判斷是否染菌，只有培養(yǎng)一段時(shí)間才能發(fā)現(xiàn)，最后也只能作廢，十分影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)度及成本。因此，為了確保不會(huì)染菌和實(shí)驗(yàn)的順利，在操作前也要按照規(guī)范進(jìn)行無(wú)菌操作。除了之前對(duì)于發(fā)酵罐體的滅菌操作，在接種時(shí)更是要注意。
 

1. 發(fā)酵罐的接種量
首先需要注意把控接種量，適宜的接種量可幫助罐內(nèi)的菌種繁殖，發(fā)酵產(chǎn)物快速生成，同時(shí)也可減少雜菌生長(zhǎng)。但過(guò)大過(guò)小都會(huì)影響產(chǎn)物繁殖。
l 接種量過(guò)大時(shí)，由于發(fā)酵罐內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)和氧氣量是一定，而菌種過(guò)量，會(huì)很容易導(dǎo)致發(fā)酵罐內(nèi)溶氧不足，還會(huì)有大量的代謝物，產(chǎn)物合成受到阻礙；
l 接種量過(guò)小時(shí)，發(fā)酵液中培養(yǎng)物不足，發(fā)酵時(shí)間推遲，發(fā)酵罐的生產(chǎn)效率大大降低
那么，究竟如何確定接種量呢？其實(shí)也就是將接種液體體積和之后的培養(yǎng)液體積。按照規(guī)定百分比確定即可。

 
2.發(fā)酵罐的接種方式
其次就是接種的方法。對(duì)于大型的工業(yè)化生產(chǎn)通常是采用發(fā)酵罐的壓力差來(lái)進(jìn)行接種。而對(duì)于小型發(fā)酵罐則是采用另外兩種方式進(jìn)行接種：火焰接種和注射器接種。
 

注射器接種
步驟1 將接種口和周圍用酒精棉進(jìn)行消毒，操作者雙手也要消毒
步驟2 調(diào)節(jié)發(fā)酵罐罐壓（具體操作見(jiàn)下篇）
步驟3 準(zhǔn)備好無(wú)菌的注射器（提前在超凈臺(tái)吸入菌種液體），無(wú)菌操作將種子液安全注入發(fā)酵罐內(nèi)。
此種接種方式可以避免菌種與外界空氣接觸，避免了明火使用，適用于5L以下的小型發(fā)酵罐。
 
今天先帶大家了解其中一種接種方式，繼續(xù)關(guān)注霍爾斯（HOLVES），下篇接著講述。